Який основний принцип реакції Фельгена?

Реакція Фельгена заснована на кислотно-каталізоване видалення пуринових основ з дезоксирибози, що призводить до утворення альдегіду, який можна виявити за допомогою реактиву Шиффа.

Фарбування за Фельгеном може візуалізувати ДНК на зрізах тканин і в клітинах. Це фарбування є найбільш використовуваним фарбуванням для виділення ДНК в гістології. Принцип фарбування за Фельгеном полягає в роз’єднанні двох ланцюгів ДНК шляхом гідролізу молярним розчином HCl, який руйнує пуринові основи.

Протокол

• Доведіть зрізи до води за допомогою ксилолу та етанолу.
• Коротко промийте холодною 1N соляною кислотою.
• Помістіть у попередньо нагріту соляну кислоту на відповідний час при 60°C.
• Коротко промийте холодною 1N соляною кислотою.
• Коротко промийте дистильованою водою.

Реакція Фельгена в даний час є методом вибору для визначення ДНК в гістологічних і цитологічних препаратах. Оскільки було визнано важливість вмісту ДНК для діагностики та прогнозу злоякісних пухлин, у цих випадках все частіше використовується аналіз зображень ДНК.

Техніка Feulgen вибірково забарвлює ДНК і в контрольованих умовах може бути використана для фотометричне визначення вмісту ДНК. Реакція складається з двох етапів. Фіксований матеріал обробляють протягом 8-10 хв 1N HCl на водяній бані або в печі при 60°C.

Реакція Фельгена заснована на кислотно-каталізоване видалення пуринових основ з дезоксирибози, що призводить до утворення альдегіду, який можна виявити за допомогою реактиву Шиффа.

Йоахім Вільгельм Роберт Фельген (2 вересня 1884 — 24 жовтня 1955) — німецький лікар і хімік, який у 1914 році розробив метод фарбування ДНК (тепер відомий як фарбування за Феульгеном), а також відкрив конгеніальність ядерної ДНК рослин і тварин («тимонуклеїнова кислота»).