Які принципи флуоресцентної кореляційної спектроскопії?
2024Флуоресцентна кореляційна спектроскопія (FCS) вимірює коливання інтенсивності флуоресценції внаслідок будь-яких фізичних, хімічних або біологічних впливів на цікавий флуорофор. в принципі, світло фокусується в області зразка, і вимірюються коливання інтенсивності флуоресценції в цій області.
Флуоресцентна спектроскопія використовує промінь світла, який збуджує електрони в молекулах певних сполук і змушує їх випромінювати світло. Це світло спрямовується на фільтр і на детектор для вимірювання та ідентифікації молекули або змін у молекулі.
Флуоресценція заснована на властивості деяких молекул, які коли в них потрапляє фотон, вони можуть поглинати енергію цього фотона, щоб перейти в збуджений стан. Після релаксації з цього збудженого стану та сама молекула вивільняє фотон: флуоресцентне випромінювання.
Техніка вимірює збіги зелених і червоних коливань інтенсивності різних молекул, які корелюють, якщо зелені та червоні мічені частинки рухаються разом через попередньо визначений конфокальний об’єм. FCCS використовує два види, незалежно позначені двома різними флуоресцентними зондами різних кольорів.
Принцип і теорія. FCS – це техніка, яка використовує статистичний аналіз коливань інтенсивності флуоресценції для отримання інформації про рівноважні процеси в зразку (наприклад, молекулярна дифузія або оборотні хімічні реакції), які є причиною коливань інтенсивності.
Спектроскопія є заснований на взаємодії світла і матерії. Коли речовина поглинає світло, воно зазнає збудження та зняття збудження, в результаті чого утворюється спектр. Коли речовина поглинає ультрафіолетове випромінювання, присутні в ній електрони зазнають збудження.
Флуоресцентний (FL) детектор Це явище, при якому речовина поглинає світло, щоб досягти високого рівня енергії, а потім випромінює світло, щоб повернутися до початкового рівня. Така речовина має певну довжину хвилі світла, яке вона поглинає (довжини хвилі збудження) і випромінює (довжини хвилі випромінювання).