За яким принципом поділяють ізоферменти?

82) показав, що окремі ізоферменти краще розділяти ізоелектричне фокусування. Однак межа виявлення LDH за допомогою тієї самої інкубаційної суміші тетразолію приблизно в 3-4 рази більша в процедурі мікроелектрофорезу, ніж у методі мікроізоелектричного фокусування.

Для розділення ізоферментів доступні дві основні групи процедур, а саме електрофорез та іонообмінна хроматографія. І те й інше залежить головним чином від природи та ступеня результуючого заряду білкових фракцій у використовуваному буферному розчині.

Розділення ізоферментів на основі поверхневого заряду (і меншою мірою за молекулярною масою) може бути досягнуто шляхом електрофорезу в крохмальному гелі, акриламідному гелі, агарозі, ацетаті целюлози або Cellogel за відповідних умов pH, іонної сили та іонного складу. для конкретного ферменту.

Ізоферменти. В організмі і навіть у клітині можуть існувати різні білки з однаковою ферментативною активністю. Ці різні молекулярні форми ферменту називаються ізоферментами, ізоферментами або ізоформами. Широко використовуваним методом демонстрації ізоферментів є електрофорез у гелі з подальшим специфічним фарбуванням після розділення.

Електрофорез є широко використовуваним методом для ідентифікації ізоферментів. Незалежно від того, чи використовуються гелі з поліакриламіду чи крохмалю та ізоелектричні фокусуючі гелі, ізоферменти можна відокремити та використати для «відбитків пальців» білків грибів та дріжджів.

Розділення КК на ізоферменти може бути здійснено за допомогою електрофорез, колонкова хроматографія або радіоімунологічний аналіз. Більшість клінічних лабораторій використовують електрофорез на агарозному гелі або ацетаті целюлози в поєднанні з кількісним визначенням смуги за допомогою флуорометричних або спектрофотометричних методів.

Електрофорез у агарозному гелі (AGE) є стандартним методом поділу ізоформ ДНК, причому різні ізоформи мають різну рухливість у гелі через відмінності в гідродинамічних взаємодіях і ступені заплутаності ланцюга [2].